Es la técnica más desarrollada en los últimos
años, empleada en la química analítica.
Su empleo presenta notables ventajas:
1. Es sencilla,
rápida y no requiere aparatos complicados.
2.Abarca escalas microanalíticas hasta
escalas industriales.
3.Es una técnica poco o nada destructiva
que puede aplicarse a sustancias lábiles (fáciles de transformar en otras más estables)
Constituye una metodología
imprescindible en estudios bioquímicos, toxicológicos, estructurales, etc. No
solo utilizando como técnica de separación e identificación, sino como método
preparatorio, incluso a escalas industriales.
La palabra cromatografia proviene de
kromatos, color y graphos, escrito.
Una de las definiciones de la técnica
más correcta sería, la dada por Keulemans:
"Método
físico de separación en el que los componentes a separar se distribuyen en dos
fases, una de las cuales constituye un hecho estacionario de gran desarrollo
superficial y la otra un fluido que pasa a traves o a lo largo del lecho estacionario (fase
móvil)."
En todo proceso cromatografico la fase
móvil es la que provoca un movimiento de las distintas especias para que
abandonen el medio soporte, y la fase estacionaria la que suministra el efecto
retardador, selectivo para cada componente, que condiciona que cada uno de
ellos se desplace con distinta velocidad.
CROMATOGRAFIA EN PAPEL
¿Qué es la
cromatografia en papel?
La
cromatografia en papel es la técnica de separación e identificación de
sustancias químicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de
papel de filtro.
Se toma una
pieza de papel de filtro y cerca de uno de sus extremos se deposita una gota de
la solución que contiene la mezcla de las sustancias que se quieren separar. Se
deja secar la gota y quedará la mancha de las sustancias mezcladas. El extremo
del papel mas próximo a la mancha se introduce en un disolvente apropiado, pero
sin que la mancha llegue a introducirse en él.
Existen
muchos tipos de cromatografia sobre papel, una primera división de las variadas
clases podría ser:
1-Cromatografia ascendente: el
disolvente se encuentra en el fondo del
recipiente que sostiene al papel y va subiendo a traves de el por capilaridad.
2-Cromatografia descendente: el
disolvente esta en un recipiente esta en un recipiente del que cuelga el papel,
fluye por él hacia abajo por una combinacion de capilaridad y gravedad.
En
ambos casos el disolvente avanza a lo largo del papel pasando por encima de la
mancha, al avanzar disuelve y arrastra las sustancias de la mancha, cada una de
ellas se mueve, por lo general a distinta velocidad que las otras.
Se deja
actuar el disolvente un tiempo determinado, se seca el papel y se observan las
sustancias separadas si tienen color, o en caso de no tener color se procede al
revelado por una reacción química apropiada.
PROCEDIMIENTO
MATERIALES:
- Hojas de espinacas
- 10 centímetros cúbicos de éter de petróleo
- dos centímetros cúbicos de alcohol etílico PROCEDIMIENTO DE EXTRACCIÓN DE CLOROFILA: Se machacan las hojas, se le añade el éter y el alcohol y se sigue machacando, se vierte en una placa grande y se coloca papel de fieltro en forma de hoja doblada. La mezcla asciende por capilaridad y dará tres bandas distintas de color de abajo a arriba: Clorofila A, Clorofila B y Xantofilas IMÁGENES DE EL PROCESO DE LA CROMATOGRAFÍA :
Usamos hojas frescas de lechuga,que luego serian machacadas, para esta practica.
También hicimos cromolitografías de tinta de rotulador con los mismos productos quimicos , en este caso de marcador rojo.
Y en este con verde ,ademas se puede ver mas o menos que las espinacas han dejado en el papel de filtro tres zonas la amarilla que es xantofila, y clorofila A y B
Y aqui se puede observar 3 cromatografias de rosa+naranja, verde y muestra vegetal
Por último se muestra un experimiento casero parecido al que realizamos.
Aqui vemos tubos de ensayo, material indispensable para esta practica
primero hemos de batir un plátano con 250 mL de agua destilada
otros materiales a usar en la practica
se mezcla una cucharadita de lavavajillas o detergente con 20 mL de agua destilada
y ademas se le añade una pizca de sal
aqui vemos las dos mezclas
hielos para reducir la temperatura del alcohol
vemos como se coloca el papel de filtro para pasar la mezcla
recortando el papel de filtro
se filtra el resultado de la union de las anteriores mezclas
se deja reposar hasta que el adn se deposita el la parte superior
resultado final
